细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠肾成纤维分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。肾成纤维细胞是肾脏结缔组织中重要的细胞类型，在体外培养中，一般大致成梭形、多角形或不规则形等，为贴壁生长型细胞。刚分离的肾成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。其主要功能有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠肾成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠肾成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠肾成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肾组织 | 产品货号 | YS-01X7257 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3代左右 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠亚铁螯合酶(FECH)试剂盒 ，英文名： FECH ELISA Kit Mouse coagulation factor II (F II) ELISA Kit 小鼠Ⅱ(FⅡ)试剂盒 Mousebasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 小鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)试剂盒 进口分装 CLIAKitforHumanCollectinELISAKit人胶原凝集素 细胞CDK1/CYCLINB激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitu-T4大鼠高敏甲状腺素 兔子细胞间粘附分子2试剂盒 兔子细胞间粘附分子2试剂盒 规格型号：96T/48T 兔子细胞间粘附分子2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子细胞间粘附分子2试剂盒、兔子细胞间粘附分子2eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 兔子细胞间粘附分子1试剂盒 兔子细胞间粘附分子1试剂盒 规格型号：96T/48T 兔子细胞间粘附分子1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子细胞间粘附分子1试剂盒、兔子细胞间粘附分子1eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 兔子脱氧酚试剂盒 兔子脱氧酚试剂盒 规格型号：96T/48T 兔子脱氧酚试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：兔子脱氧酚试剂盒、兔子脱氧酚eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 猪氧化酶试剂盒 猪氧化酶试剂盒 规格型号：96T/48T 猪氧化酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪氧化酶试剂盒、猪氧化酶eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体 小鼠标志物(CA724)ELISA 试剂盒 Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗体(EMAb)试剂盒 HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S转移酶(GSTs)试剂盒 进口分装 CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗体 伊红复染试剂盒50次 Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)试剂盒 肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体 PECAM1重组小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 标签) Protein BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)(多肽片断抗原) IGF1重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein GADD45A Protein Human 重组人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 标签) TNFSF12 Protein Rat 重组大鼠 TNFSF12 蛋白 小鼠肾成纤维细胞BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)(多肽片断抗原) GADD45A Protein Human 重组人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 标签) PECAM1重组小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 标签) Protein TNFSF12 Protein Rat 重组大鼠 TNFSF12 蛋白 IGF1重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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