细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠胚肺成纤维分离自胚肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞在合成和分泌细胞因子、维持血管内外和凝血和纤溶的的动态平衡中起重要作用。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠胚肺成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠胚肺成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠胚肺成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 胚胎；肺组织 | 产品货号 | YS-01X7552 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3-5代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠胰高血糖素样肽1(GLP1)试剂盒 ，英文名： GLP1 ELISA Kit Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠内皮素1(ET-1)试剂盒 MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞浆免疫球蛋白 细胞ATP酶活性染色试剂盒50次 ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9 微量DNA凝胶回收试剂盒 50T MiniELGelExactionKit 100T 微量样品 50T MiniEleDNAKit 100T 磷酸化真核启动因子2α抗体 小鼠胆囊收缩素/肠促肽(CCK)ELISA 试剂盒 96T/48T Human placeal ribonuclease inhibitor (HPRI) ELISA Kit 人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)试剂盒 Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanAttacin,Att试剂盒人抗菌肽(Att)试剂盒规格：96T/48T 植物源性食品榛果(hazeln)试剂盒20次 Humahrombomodulin，TMELISAKit人血栓调节蛋白(TM)试剂盒规格：96T/48T 抑制素βC抗体 EFNB3重组大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag标签多肽 CST1重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein FGFBP3 Protein Human 重组人 FGFBP3 蛋白 FETUB Protein Mouse 重组小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 小鼠胚肺成纤维细胞Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag标签多肽 FGFBP3 Protein Human 重组人 FGFBP3 蛋白 EFNB3重组大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein FETUB Protein Mouse 重组小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 CST1重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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