细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠尿道上皮分离自尿道管组织；尿道是从膀胱通向体外的管道。尿道上皮细胞主要功能：①尿道上皮细胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多种功能特殊类型的细胞组成；②上皮细胞组成膀胱的防御系统与病原体接触，它们具有多种防御机制来阻止病原体粘着，保持泌尿器溶解物的不渗透性；③膀胱上皮细胞表达雌激素α、β受体，上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体，在损伤和感染时，这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用；④能释放许多细胞因子、免疫系统介质。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠尿道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠尿道上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠尿道上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 尿道组织 | 产品货号 | YS-01X7260 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传1-2代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠细胞色素P450家族成员1A1(CYP1A1)试剂盒 ，英文名： CYP1A1 ELISA Kit Mouse epinephrine (EPI) ELISA Kit 小鼠(EPI)试剂盒 MouseCholecystokinin,CCKELISAKit 小鼠胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒 进口分装 CLIAKitforHSP-70(HumanHeatShockProtein70)ELISAKit人热休克蛋白70 细胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性试剂盒20次 ELISAKitIL-2大鼠白介素2 胃动蛋白2 英文名称： Human Gasokine 2 英文缩写： GKN-2 内源性糖皮质激素 英文名称： Human Glucocoicoid Endogenous 英文缩写： GC 葡萄糖激酶 英文名称： Human Glucokinase 英文缩写： GCK 葡萄糖60酸脱氢酶 英文名称： Human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 英文缩写： G6PD 细胞色素B抗体 小鼠蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA 试剂盒 Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒 Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISAKit 人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)试剂盒 进口分装 Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMA试剂盒人不对称二甲基精(ADMA)试剂盒 植物源性食品土豆(potato)试剂盒20次 Humahymicsomallymphopoietin,TSLPELISAKit人基质淋巴细胞生成素(TSLP)试剂盒 FGF4单克隆抗体 EPCAM重组大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein Gentamicin/OVA 庆大偶联鸡卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 庆大偶联鸡卵白蛋白 SPEG重组人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 标签) Protein FGF19 Protein Human 重组人 FGF19 蛋白 ECM1 Protein Mouse 重组小鼠 ECM1 蛋白 (His 标签) 小鼠尿道上皮细胞Gentamicin/OVA 庆大偶联鸡卵白蛋白 2mgGentamicin/OVA 庆大偶联鸡卵白蛋白 FGF19 Protein Human 重组人 FGF19 蛋白 EPCAM重组大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein ECM1 Protein Mouse 重组小鼠 ECM1 蛋白 (His 标签) SPEG重组人 SPEG / APEG-1 蛋白 (His 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
