细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠卵巢成纤维分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面，其主要特点和功能：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠卵巢成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠卵巢成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠卵巢成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 卵巢组织 | 产品货号 | YS-01X7218 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3代左右 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠生长分化因子2(GDF2)试剂盒 ，英文名： GDF2 ELISA Kit Mouse gasic cancer marker CA199ELISA Kit 小鼠胃肠癌标志物CA199试剂盒 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒 进口分装 CLIAKitforHCV-IgG(HumanHepatitisCvirusIgG)ELISAKit人型肝IgG 细胞WEE1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 Wheatgermagglinin,WGAELISAKit麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)试剂盒 腺苷脱酶（ADA）检测 Salivary acid (SA) detection 唾液酸（SA）检测 Apoptosis (TdT mediated by in situ end of the double labelling method) detection 细胞凋亡（TdT介导的原位末端切口平移双标记法）检测 Vitamin E (VE) detection Vitamin C (VC) detection 重组缺氧诱导因子2α / EPAS1兔单克隆抗体 小鼠附睾蛋白4(HE-4)ELISA 试剂盒 Human aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 人水通道蛋白5(AQP-5)试剂盒 HumanplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)试剂盒 进口分装 HumanApolipoproteinH,apo-H试剂盒人载脂蛋白H(Apo-H)试剂盒 植物叶绿体核糖体分离试剂盒10次 HumaNFαconveingenzyme,TACEELISAKit人坏死因子α转化酶(TACE)试剂盒 β淀粉样肽（1-42）单克隆抗体 CAMK4重组小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 标签) Protein 促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)重组蛋白 Recombinant Tubulin Polymerization Promoting Protein (TPPP) TSPAN8重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (His 标签) Protein FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 标签) CD200 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200 蛋白 小鼠卵巢成纤维细胞促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)重组蛋白 Recombinant Tubulin Polymerization Promoting Protein (TPPP) FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 标签) CAMK4重组小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 标签) Protein CD200 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200 蛋白 TSPAN8重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (His 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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