细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠结肠黏膜上皮分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。探讨正常结肠黏膜上皮细胞的分离、体外培养方法，为研究肠黏膜上皮细胞以及与肠黏膜相关疾病建立合适的细胞模型。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠结肠黏膜上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 结肠组织 | 产品货号 | YS-01X7491 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传1-2代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠酶Ⅸ(CA9)试剂盒 ，英文名： CA9 ELISA Kit Mouse glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 小鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)试剂盒 RatCoisolELISAKit 大鼠(Coisol)试剂盒 进口分装 CLIAKitforHLA-G(HumanleukocyteaigenG)ELISAKit人类白细胞抗原G 细胞PKD2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitC-Peptide大鼠C肽 小鼠8-羟基脱氧8-OHdG鸟苷酸(mouse 8-OHdG) 作用： ELISA 小鼠食欲素A(mouse Orexin A) 作用： ELISA 小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL) 作用： ELISA 小鼠抑瘤素mouse M(mouse OSM) 作用： ELISA MFSD2B蛋白抗体 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 试剂盒 Human aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 人水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒 HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 人Ⅱ(FⅡ)试剂盒 进口分装 HumanApelin36,AP12试剂盒人Apelin36(AP36)试剂盒 植物氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(单线态氧气)20次 Humaotalbileacide,TBAELISAKit人总胆汁酸(TBA)试剂盒 降钙素抗体 CD40LG重组小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 Protein 成纤维细胞生长因子23(FGF23)重组蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) PTPN12重组人 PTPN12 蛋白 Protein FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签), Biotinylated PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 小鼠结肠黏膜上皮细胞成纤维细胞生长因子23(FGF23)重组蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签), Biotinylated CD40LG重组小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 Protein PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 PTPN12重组人 PTPN12 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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