细胞简介: 
小鼠角膜成纤维分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持角膜的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 方法简介:

公司实验室分离的小鼠角膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测:

公司实验室分离的小鼠角膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠角膜成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 眼角膜组织 | 产品货号 | YS-01X7394 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3代左右 消化液 0.25% 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 
细胞传代步骤:
 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 细胞冻存步骤:
 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 公司正在出售的产品:
 大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)试剂盒 ,英文名: β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit Mouse gonadoopin-releasing hormone (GH) ELISA Kit 小鼠释放激素(GH)试剂盒 ELISA 小鼠血小板相关抗体IgG(mouse PAIgG) 进口分装 CLIAKitforIL-1Beta(RabbitIerleukin1Beta)ELISAKit兔白介素1β 通用型牛病毒性腹泻病毒II型(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR扩增试剂盒20次 ELISAKitASD大鼠雄烯二同 小鼠B细胞淋巴瘤因子试剂盒 小鼠B细胞淋巴瘤因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠B细胞淋巴瘤因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠B细胞淋巴瘤因子试剂盒、小鼠B细胞淋巴瘤因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 小鼠Ⅳ型胶原试剂盒 小鼠Ⅳ型胶原试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠Ⅳ型胶原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠Ⅳ型胶原试剂盒、小鼠Ⅳ型胶原eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 小鼠Ⅲ型前胶原肽试剂盒 小鼠Ⅲ型前胶原肽试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠Ⅲ型前胶原肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠Ⅲ型前胶原肽试剂盒、小鼠Ⅲ型前胶原肽eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 小鼠Ⅱ型胶原试剂盒 小鼠Ⅱ型胶原试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠Ⅱ型胶原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠Ⅱ型胶原试剂盒、小鼠Ⅱ型胶原eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 ZC4H2蛋白抗体 小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA 试剂盒 Human receptor tyrosine kinase (Ks) ELISA Kit 人受体酪激酶(Ks)试剂盒 HumanD-Dimer,D2DELISAKit 人D二聚体(D2D)试剂盒 进口分装 humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMAB试剂盒人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)试剂盒 植物腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次 Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白(TAP)试剂盒 腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体 IL2重组小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein 沉默调节蛋白2(SIRT2)重组蛋白 Recombinant Sirtuin 2 (SIRT2) IL10重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签), Biotinylated CD53 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) 小鼠角膜成纤维细胞沉默调节蛋白2(SIRT2)重组蛋白 Recombinant Sirtuin 2 (SIRT2) FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签), Biotinylated IL2重组小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein CD53 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) IL10重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
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