细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠骨髓来源内皮祖分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠骨髓来源内皮祖采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠骨髓来源内皮祖经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠骨髓来源内皮祖细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 骨髓 | 产品货号 | YS-01X7439 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传1-2代；不建议多次传代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)试剂盒 ，英文名： VEGFR3 ELISA Kit Mouse hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 小鼠轻化1(HYD)试剂盒 Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanBetacatenin,Beta-CatELISAKit人β连环蛋白/联蛋白 细胞D-乳酸比色法定量试剂盒20次 ELISAKiesistin大鼠抵抗素 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠上腺素(EPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T 溶质载体家族25成员35抗体 小鼠核因子kb(NF-kb)试剂盒 96T/48T Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanAi-OvaryAibody,AOAb试剂盒人抗卵巢抗体(AOAb)试剂盒规格：96T/48T 植物高效液相色谱法定量试剂盒20次 Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)试剂盒规格：96T/48T 16号染色体开放阅读框41抗体 CLEC10A重组小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 标签) Protein VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)重组蛋白 Recombinant VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF) SMPDL3A重组人 SMPDL3A 蛋白 Protein FABP1 Protein Human 重组人 L-FABP / FABP1 蛋白 IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 小鼠骨髓来源内皮祖细胞C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)重组蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A) FABP1 Protein Human 重组人 L-FABP / FABP1 蛋白 DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein FCGR3A Protein Rat 重组大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白 BPIFA2重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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