细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠肝内胆管上皮分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠肝内胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠肝内胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠肝内胆管上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肝脏组织 | 产品货号 | YS-01X7153 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传1-2代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠卵白蛋白(OVA)试剂盒 ，英文名： OVA ELISA Kit Mouse insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)试剂盒 RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforGDI(HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor)ELISAKit人鸟苷酸解离抑制因子 细胞元素比色法定量试剂盒20次 RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)试剂盒规格：96T/48T 小鼠白介素 -12 (mouse IL-12) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 Biosource 小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D 小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70) 作用： ELISA 规格： 96T 奥地利 Bender 小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13) 作用： ELISA 规格： 96T 美国 Biosource Opticin蛋白抗体 小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA 试剂盒 96T/48T Human ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 人抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)试剂盒 HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 人二0酸腺苷(ADP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforACA(Humanai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit人抗中性粒/中心体抗体 一步法平端PCR反应液50次 MouseOncostatin-M,OSMELISAKit小鼠抑瘤素M(OSM)试剂盒规格：96T/48T 聚磷酸肌醇磷酸酶5A抗体 SMPD1重组小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein 白介素1α(IL1α)重组蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a) CPNE1重组人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein ERN1 Protein Human 重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 标签) IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 标签) 小鼠肝内胆管上皮细胞APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉样肽前体蛋白(多肽抗原) ERN1 Protein Human 重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 标签) EFNB1重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein CNTN3 Protein Rat 重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 MS4A1重组人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
