细胞传代步骤:
 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介: 
小鼠肝动脉平滑肌分离自肝动脉组织;在胚胎期,肝脏有3条动脉供血,分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉,这3条动脉分别肝脏的不同部位。出生后,一般保留一条动脉,大部分为起源于腹腔动脉的动脉,由其分出左、右肝动脉左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况,如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%),起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉(10%),而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外,还有5%像胚胎期一样,3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉,如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时,此种异位起源的肝动脉称替代动脉,如果在常见肝动脉类型外,还有一支这种异位起始的动脉肝脏的一部分血流,这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉平滑肌细胞是肝动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肝动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素,新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应,并且与血管疾病的发展及稳定性有关。 方法简介:

公司实验室分离的小鼠肝动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测:

公司实验室分离的小鼠肝动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠肝动脉平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肝动脉组织 | 产品货号 | YS-01X7142 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传3代左右 消化液 0.25% 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 
细胞复苏步骤:
 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品:
 大鼠神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)试剂盒 ,英文名: NPTX2 ELISA Kit Mouse iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒 RatAi-thyroid-globulinaibody,ATGA/TGABELISAKIT 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHBsAb(立可读)乙型肝表面抗体 细胞β-内酰胺酶报告基因活性荧光定量试剂盒20次 SheepIerleukin6,IL-6ELISAKit绵羊白介素6(IL-6)试剂盒规格:96T/48T 小鼠白介素-12(mouse IL-12) 作用: ELISA 小鼠白介素-13(mouse IL-13) 作用: ELISA 小鼠白介素-15(mouse IL-15) 作用: ELISA 小鼠白介素-17(mouse IL-17) 作用: ELISA 转录激活蛋白PURB单克隆抗体 小鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat phosphorylated protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)试剂盒 humangonadoopin-releasinghormone,GHELISAKit 人释放激素(GH)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA试剂盒人抗髓0脂抗体IgA(AMAIgA)试剂盒规格:96T/48T 植物氢ATP酶(H+-ATPase)总活性比色法定量试剂盒20次 humanuridinephosphorylase1,UPP1ELISAKit人尿核苷0酸化酶1(UPP1)试剂盒规格:96T/48T 白介素-17E抗体 NS1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural / NS1 蛋白 Protein Ractopamine/BSA 莱克多巴胺与牛血清白蛋白偶联物 1mgRactopamine/BSA 莱克多巴胺与牛血清白蛋白偶联物 TNFRSF4重组人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 Protein ERBB4 Protein Human 重组人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 ESAM Protein Human 重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 标签) 小鼠肝动脉平滑肌细胞FAS (Apo-a1; CD95; 0.5mgFAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 载脂蛋白-a1 ERBB4 Protein Human 重组人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 VEGFC重组大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 标签) Protein CD19 Protein Mouse 重组小鼠 CD19 / Leu-12 蛋白 CSTB重组人 Cystatin B / CSTB 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|