细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

小鼠肺大静脉平滑肌分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。肺大静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。该细胞参与血管壁炎症反应，保持静脉管腔的通畅，还是多数动脉疾病的靶细胞。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠肺大静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠肺大静脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠白介素7受体(IL-7R)试剂盒 ，英文名： IL-7R ELISA Kit

Mouse ierleukin 16 (IL-16) ELISA Kit 小鼠白介素16(IL-16)试剂盒

ELISA 小鼠心肌转录因子3(mouse GATA3)  进口分装

CLIAKitforIP-10/CXCL10(Humanierferon-inducibleprotein10)ELISAKit人干扰素诱导蛋白10

通用型福氏志贺氏菌(Shigellaflexneri)试剂盒20次

ELISAKitLp-α大鼠脂蛋白α

小鼠白介素5(IL-5)试剂盒   96T/48T

小鼠白介素4(IL-4)试剂盒   96T/48T

小鼠白介素35（IL-35）试剂盒   96T/48T

小鼠白介素-33(IL-33)试剂盒   96T/48T

3号染色体开放阅读框21抗体

小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)试剂盒

HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAi-keratinaibody,AKA试剂盒人抗角蛋白抗体(AKA)试剂盒规格：96T/48T

植物弥散吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量试剂盒(包括萃取)20次

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorB，VEGF-BELISAKit人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)试剂盒规格：96T/48T

磷酸化内质网核信号转导蛋白a1抗体

EFNB2重组大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

GSK-3 Beta(NT 0.5mgGSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原)

FES重组人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 标签) Protein

EPHB4 Protein Human 重组人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 标签)

CFD Protein Mouse 重组小鼠 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

小鼠肺大静脉平滑肌细胞GSK-3 Beta(NT 0.5mgGSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原)

EPHB4 Protein Human 重组人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 标签)

EFNB2重组大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein

CFD Protein Mouse 重组小鼠 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

FES重组人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取