细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔直肠黏膜上皮分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以门而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。 方法简介：
实验室分离的兔直肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔直肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔直肠黏膜上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 直肠 | 产品货号 | YS-01X8481 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：上皮细胞样 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔直肠黏膜上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠黄体生成素(LH)试剂盒 ，英文名： LH ELISA Kit Rabbit cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 兔环0酸腺苷(cAMP)试剂盒 脑膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T CLIAKitforMouseLysozyme,LZMELISAKit小鼠 体液过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量试剂盒20次 ELISAKitOH人25羟基D3 乙酰酯酶（T－CHE）检测 Acetylcholine ansferase (ChAT) detection 乙酰转移酶（ChAT）检测 Detection of the ache of the choline 丁酰酯酶检测 Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection 葡萄糖-6-0酸脱氢酶（G－6－PD）检测 BN N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detection 突触融合蛋白1A/1B抗体 G蛋白偶联受体10抗体 TNF重组小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein CCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 0.5mgCCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 CNTN4重组人 Contactin 4 / CNTN4 蛋白 (His 标签) Protein CA7 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase VII / CA7 蛋白 (His 标签) IL22RA2 Protein Rat 重组大鼠 IL22BP / L22RA2 蛋白 CCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 0.5mgCCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 CA7 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase VII / CA7 蛋白 (His 标签) TNF重组小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein IL22RA2 Protein Rat 重组大鼠 IL22BP / L22RA2 蛋白 CNTN4重组人 Contactin 4 / CNTN4 蛋白 (His 标签) Protein 兔直肠黏膜上皮细胞鸭子乙酰羧化酶(ACC)试剂盒 Human ai ovary aibody (AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗体(AOAb)试剂盒 HumanVitaminB6,VB6ELISAKit 人B6(VB6)试剂盒分装 CLIAKitforADAM8(HumanADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKit人解整合素样金属蛋白酶8 血液总氨基酸含量比色法定量试剂盒20次 MouseP-SelectinELISAKit小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)试剂盒 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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