细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔心脏微血管周分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明，心肌微血管周细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。 方法简介：
实验室分离的兔心脏微血管周采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔心脏微血管周经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔心脏微血管周细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 心脏 | 产品货号 | YS-01X8457 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔心脏微血管周体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)试剂盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit Mouse FMS like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3L) ELISA Kit 小鼠FMS样酪激酶3配体(Flt3L)试剂盒 ELISA 小鼠粒细胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 分装 CLIAKitforLDLELISAKit大鼠低密度脂蛋白 通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量试剂盒20次 ELISAKiths-CRP猴超敏C反应蛋白 虾胺/酚乙醇胺 英文名称： Octopamine 英文缩写： OPM 河蟹5羟色胺 英文名称： 5-Hydroxyyptamine 英文缩写： 5-HT 鲈鱼 英文名称： Coisol 英文缩写： CO 鲈鱼/胞壁质酶 英文名称： Lysozyme /Muramidase 英文缩写： Lysozyme 环指蛋白113B抗体 PAP1结合蛋白抗体 ART4重组小鼠 Art4 / CD297 蛋白 Protein 促胰液素(SCT)重组蛋白 Recombinant Secretin (SCT) FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 标签) Protein FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 标签) IFNGR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌动蛋白(抗原) FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 标签) ENPP2重组小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 标签) Protein ALCAM Protein Rat 重组大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 标签) ANTXR1重组人 ANTXR1 蛋白 Protein 兔心脏微血管周细胞小鼠多瘤病毒(POLY)试剂盒 Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人丝狀血球凝集素(FHA)试剂盒 RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)试剂盒分装 HumanAquaporin1,AQP-1试剂盒人水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒 植物乙酰乙酰转移酶(ACAT)活性比色法定量试剂盒20次 Humaissuefactor，IFELISAKit人组织因子(TF)试剂盒 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
