细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔小梁网分离自眼球组织；小梁网由角膜基质纤维、后界膜和角膜内皮向后扩展而成，覆盖在巩膜静脉窦的内侧。小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用；小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体，其中包括肾上腺素、乙酰和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种逆致盲眼病，小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。在小梁网细胞中，一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制，小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。形态学观察可见，刚从组织块长出的原代细胞，形态各异，多数呈星状或不规则形。细胞有胞突，核椭圆形，胞体肥大，胞浆丰富，且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层，细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失，排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮，包膜清晰。 方法简介：
实验室分离的兔小梁网采用组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔小梁网经NSE(神经元特异性烯醇化酶)免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔小梁网细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 眼球 | 产品货号 | YS-01X8453 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：梭形、多角形 传代特性：可传2-3代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔小梁网体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠淋巴毒素β(LTβ)试剂盒 ，英文名： LTβ ELISA Kit Mouse inhibin A (INH-A) ELISA Kit 小鼠抑制素A(INH-A)试剂盒 RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforGamma-ECS(HumanGamma-glamylsysteinesyhetase)ELISAKit人γ谷氨酰半胱合成酶 细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒10次 RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)试剂盒规格：96T/48T 小鼠β细胞素(BTC)试剂盒 小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)试剂盒 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)试剂盒 小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒 快速发育生长因子同源蛋白2抗体 PE标记人CD1a单克隆抗体 APCS重组小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2 0.5mgCNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗原 BNIP3L重组人 BNIP3L 蛋白 Protein F3 Protein Human 重组人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 (Fc 标签) FZD1 Protein Mouse 重组小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2 0.5mgCNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗原 F3 Protein Human 重组人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 (Fc 标签) APCS重组小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein FZD1 Protein Mouse 重组小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 BNIP3L重组人 BNIP3L 蛋白 Protein 兔小梁网细胞小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA pcr检测试剂盒 Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白(x)试剂盒 humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 人高敏甲状腺素(u-T4)pcr检测试剂盒分装 humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCA试剂盒人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)试剂盒规格：96T/48T 植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒(包括抗体)10次 humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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