细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔胚胎肢芽间充质干分离自胚胎肢芽；胚胎肢芽存在于两栖类以上的大多数脊椎动物胚胎中，在四肢发生的初期阶段，在身体两侧有呈芽状的突起，内部是中胚层侧板的体壁板垱厚形成，表面有表皮覆盖。在这个中胚层区肢芽迅速伸长，不久，在其前端即见有指的突起。在此时期间，其内部的中胚层分化成软骨、肌肉等。这些分化组织，在将肢芽作分离培养的时候也可以获得。根据对两栖类的有尾类的研究，作为肢原基各部的胚发能力，肢芽物质的大部分是位于背半部，而前半部主要参与基部形成，后半部参与前端的形成。在实验上，即使将肢的原基分成二半，每一半调整好都可形成基本上近于正常形态的肢体，而且肢体各轴的极性和侧性也逐渐决定。间充质干细胞（MSC）是属于中胚层的一类多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中，是具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞；这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，并在特定条件下转变成为一种或多种构成机体组织或器官的细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用。 方法简介：
实验室分离的兔胚胎肢芽间充质干采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔胚胎肢芽间充质经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔胚胎肢芽间充质干细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 胚胎： | 产品货号 | YS-01X8407 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3-5代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔胚胎肢芽间充质干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠组胺H3受体(HRH3)试剂盒 ，英文名： HRH3 ELISA Kit Mouse ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 小鼠抗抗体(AsAb)试剂盒 Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforHumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴细胞因子 土壤(lithium)化学比色法定量试剂盒50次 ELISAKitdsDNA大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit ELISA 兔(NO)ELISAKit ELISA 兔补体蛋白3(C3)ELISAKit ELISA 兔p物质(SP)ELISAKit ELISA 生长因子受体结合蛋白10抗体 干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体 SERPIND1重组小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 SRC重组人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) Protein HAGH Protein Human 重组人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白 IL7 Protein Rat 重组大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白 CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 HAGH Protein Human 重组人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白 SERPIND1重组小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein IL7 Protein Rat 重组大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白 SRC重组人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) Protein 兔胚胎肢芽间充质干细胞小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA pcr检测试剂盒 Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒 Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盘蛋白(PP)pcr检测试剂盒分装 HumancicaicialPemphigoid,CP试剂盒人瘢痕性天疱疮抗体(CP)试剂盒规格：96T/48T 组(leucine)含量比色法定量试剂盒20次 humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
