细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

兔脑成纤维分离自脑组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脑成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

实验室分离的兔脑成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔脑成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔脑成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠载脂蛋白C2(APOC2)试剂盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit

Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)pcr检测试剂盒分装

CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人丝狀血球凝集素

细胞/组织高粘性多聚赖载玻片制备试剂盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-7大鼠基质金属蛋白酶7

小鼠甲状腺素抗体(TAb)试剂盒

小鼠甲状腺素(T4)试剂盒

小鼠甲状腺球蛋白(TG)试剂盒

小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)试剂盒

锌指蛋白547抗体

酪蛋白激酶NKF3抗体

AARS重组小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 蛋白 Protein

T-细胞免疫调节因子1(TCIRG1)重组蛋白 Recombinant T-Cell, Immune Regulator 1 (TCIRG1)

CXCL11重组人 I-TAC / CXCL11 蛋白 Protein

DAPK3 Protein Human 重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签)

EPCAM Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白

CD72分子(CD72)重组蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

DAPK3 Protein Human 重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签)

CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 标签) Protein

CST3 Protein Rat 重组大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

AZGP1重组人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein

兔脑成纤维细胞小鼠淋巴细胞因子ELISA pcr检测试剂盒

Human prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 人前列腺素E1(PGE1)试剂盒

Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit 人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)pcr检测试剂盒分装

Humanadenylylcyclase1,AC-1试剂盒人腺苷酸环化酶1(AC-1)试剂盒规格：96T/48T

植物ATP生物发光法定量试剂盒50次

Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit小鼠碱性0酸酶(ALP)试剂盒规格：96T/48T

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取