细胞简介：

兔颈动脉平滑肌分离自颈动脉组织；颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉。前者分布至头顶部和颜面部。后者进入颅内分布至脑和眼眶内。在发生时，鳃弓中不形成鳃的下颌弓，所以，从大动脉也不分入鳃动脉和出鳃动脉。从腹大动脉的前方发出颈外动脉，颈内动脉是通向第三鳃弓的血管延伸而形成的，但在某些鱼类、有尾两栖类和爬行类中，这一血管也将一些血液送至大动脉根。其它的高等脊椎动物的大动脉根，在第三、第四大动脉弓之间消失，所以，其第三大动脉弓形成纯粹的颈动脉。在相当于第三、第四大动脉弓之间的腹行大动脉的部分称为颈总动脉干（common co-rotid trunk）；高等脊椎动物，是由颈总动脉干分为左、右颈总动脉，然后再各分支为颈外动脉和颈内动脉。颈动脉是将血液由心脏输送至头、面、颈部的大血管，是脑的主要供血血管之一，由内膜、平滑肌层及外膜层构成。与其相关常见疾病为颈动脉狭窄，颈动脉狭窄导致的缺血症状主要包括，头晕、记忆力、定向力减退、意识障碍、黑朦、偏侧面部和/或肢体麻木和/或无力、伸舌偏向、言语不利、不能听懂别人说的话等。研究颈动脉平滑肌细胞的体外培养，为研究治疗颈动脉狭窄提供一个细胞模型具有重要意义。

方法简介：

实验室分离的大鼠颈动脉血管平滑肌采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔颈动脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔颈动脉血管平滑肌体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠硝基酪酸()试剂盒 ，英文名：  ELISA Kit

Mouse heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒

MouseCoicosterone,COELISAKit 小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒分装

CLIAKitforHumanankyrinB,Ank-BELISAKit人锚蛋白B

细胞GSK3激酶总活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitE3大鼠雌三醇

小鼠IgE   英文名称：    immunoglobulin E   英文缩写：   IgE

小鼠IgG   英文名称：    immunoglobulin G   英文缩写：   IgG

小鼠IgM   英文名称：    immunoglobulin M   英文缩写：   IgM

小鼠白介素-1α   英文名称：    ierleukin-1α   英文缩写：   IL-1α

AF750标记的磷酸化细胞核因子抗体

双甲基精水解酶1抗体

NAALADL1重组小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 标签) Protein

半乳糖凝集素1(GAL1)重组蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)

ERN1重组人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein

FAM3D Protein Human 重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签)

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 标签)

Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉样肽25-35(多肽)

FAM3D Protein Human 重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签)

NEGR1重组小鼠 NEGR1 蛋白 (His 标签) Protein

CD40 Protein Rat 重组大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白

AMPK重组人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein

兔颈动脉血管平滑肌细胞小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 试剂盒

Human growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 人生长激素释放肽ghr试剂盒

HumahymosinELISAKit 人肽(Thymosin)试剂盒分装

Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-P试剂盒人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)试剂盒

植物细胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次

Humaumorangiogenesisfactors,TAFELISAKit人血管生长因子(TAF)试剂盒