细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔呼吸道上皮分离自呼吸道；呼吸道是肺呼吸时气流所经过的通道，有肺脊椎动物的呼吸道分上、下两部：鼻、咽和喉合称上呼吸道。气管及其以后一分再分的管道，合称为下呼吸道，或称为气管树。气管树是随着动物的进化逐渐复杂化的。整个呼吸道内表面都分布有分泌液和纤毛（鼻孔、咽后壁和声带黏膜除外），它能温暖（或冷却）、湿润和净化吸入的空气，对于呼吸器官和机体有着保护作用。呼吸道以骨或软骨做支架，其内表面覆盖着黏膜，黏膜内分布着丰富的毛细血管。呼吸道上皮细胞属于假复层纤毛柱状上皮，分布于呼吸道的内表面，主要由柱状，杯形，梭形和锥形等不同形状细胞组成。看上去像复层上皮，但实际上所有细胞底部均附于基膜上，属单层上皮，故称假复层柱状上皮，上皮表面有纤毛，杯状细胞可分泌粘液，包裹着大量细菌，借助纤毛不断摆动将其慢慢移动至出消化道。 方法简介：
实验室分离的兔呼吸道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔呼吸道上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔呼吸道上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 呼吸道 | 产品货号 | YS-01X8367 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：上皮细胞样 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔呼吸道上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA 试剂盒 Human TNF related activation induced cytokine (ANCE) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(ANCE)试剂盒 Humanierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanInhibin,INH试剂盒人抑制素(INH)试剂盒规格：96T/48T 组织基质金属蛋白酶(MMP-7)活性荧光定量试剂盒20次 HumanLeptieceptor,LEPRELISAKit人瘦素受体(LEPR)试剂盒规格：96T/48T 人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit ELISA. 96T/48T 人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit ELISA. 96T/48T 人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T A(IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 酯酶抑制剂8抗体 豚鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)试剂盒 RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生长因子(EGF)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M 细菌印度墨负性染色试剂盒50次 RabbitE-SelectinELISAKit兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒规格：96T/48T 配对盒基因8抗体 PVRL1重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源) F7重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein IZUMO4 Protein Human 重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签) ACE2 Protein Mouse 重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签) 兔呼吸道上皮细胞Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源) IZUMO4 Protein Human 重组人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 标签) PVRL1重组大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein ACE2 Protein Mouse 重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 标签) F7重组人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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