细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔脑静脉血管内皮分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉医|学教育网搜集整理；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉血管内皮细胞的主要功能是维持血管内外的动态平衡，合成和分泌细胞因子和介质参与免疫反应，维持凝血和纤溶的动态平衡。 方法简介：
公司实验室分离的兔脑静脉血管内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的兔脑静脉血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔脑静脉血管内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 脑静脉组织 | 产品货号 | YS-01X7188 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传1-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠γ(FGγ)试剂盒 ，英文名： FGγ ELISA Kit Mouse pregnancy associated plasma protein A (PAPP-A) ELISA Kit 小鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)试剂盒 Mousebasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 小鼠碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforhumanadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit人促肾上腺皮质激素 细胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性试剂盒20次 ELISAKitC4大鼠补体蛋白4 小鼠抗IVIgG抗体ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠p53(p53)ELISAKit ELISA. 96T/48T PerCP-Cy5.5标记人HLA-DR单克隆抗体 小鼠泌乳素(PL)ELISA 试剂盒 96T/48T Human glucokinase (GCK) ELISA Kit 人葡萄糖激酶(GCK)试剂盒 HumanAgrinELISAKit 人聚集蛋白(Agrin)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanAcrineOrange,AO试剂盒人橙(AO)试剂盒规格：96T/48T 脂肪酸转运功能试剂盒20次 MouseangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒规格：96T/48T 脱磷酸结构域蛋白抗体 ACBD7重组人 ACBD7 蛋白 Protein Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mgSnake poison Protein 蛇毒蛋白 MET重组人 c-MET / HGFR 蛋白 Protein CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 PCSK9 Protein Human 重组人 PCSK9 / NARC1 蛋白 兔脑静脉血管内皮细胞Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mgSnake poison Protein 蛇毒蛋白 CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 ACBD7重组人 ACBD7 蛋白 Protein PCSK9 Protein Human 重组人 PCSK9 / NARC1 蛋白 MET重组人 c-MET / HGFR 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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