细胞简介：

兔海绵体平滑肌分离自海绵体组织；海绵体，又称海绵体肌，是硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌，是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

实验室分离的兔海绵体平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔海绵体平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔海绵体平滑肌体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠三叶因子3(TFF3)试剂盒 ，英文名： TFF3 ELISA Kit

Mouse signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 小鼠信号转导分子(Smad1)试剂盒

Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHABPELISAKit大鼠透明质酸结合蛋白

细胞半胱蛋白酶-7(CASPASE-7)活性荧光定量试剂盒20次

Ratverylateappearingaigen,VLAELISAKit大鼠迟现抗原(VLA)试剂盒规格：96T/48T

小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)试剂盒   96T/48T

小鼠颗粒酶B(Gzms-B)试剂盒   96T/48T

小鼠颗粒酶A(Gzms-A)试剂盒   96T/48T

3号染色体开放阅读框17抗体

小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human blood coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 人Ⅻ(FⅫ)试剂盒

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素释放肽前体(ProGRP)试剂盒 96T/48T 进口分装

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE试剂盒人12羟二十烷四烯酸(12-HETE)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母纤维二糖酶(cellobiase)活性比色法定量试剂盒20次

MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠载脂蛋白H(Apo-H)试剂盒规格：96T/48T

蛋白激酶C抗体

CST6重组小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein

半胱蛋白酶抑制剂3(CST3)重组蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)

CSNK2A2重组人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein

CSNK1G2 Protein Human 重组人 CSNK1G2 蛋白

KLRC1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 标签)

兔海绵体平滑肌细胞Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管紧张素Ⅱ受体(抗原)

CSNK1G2 Protein Human 重组人 CSNK1G2 蛋白

FZD10重组小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

IL20RB Protein Rat 重组大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 标签)

TEK重组人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 标签) Protein