细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

兔冠状动脉内皮分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。冠状动脉内皮细胞呈单层扁平分布，是一薄层的专门上皮细胞，它形成冠状动脉的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至小的微血管。

方法简介：

实验室分离的兔冠状动脉内皮采用混合酶短暂消化后组织贴块、结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔冠状动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔冠状动脉内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠脂联素受体2(ADIPOR2)试剂盒 ，英文名： ADIPOR2 ELISA Kit

Mouse soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒

MouseGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanhiston-H2bELISAKit人组蛋白H2b

B3比色法定量试剂盒20次

ELISAKitCollagenaseII大鼠胶原酶II

小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)试剂盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)试剂盒   96T/48T

拮抗凋亡转录因子重组兔单克隆抗体

小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat noradrenaline (NA) ELISA Kit 大鼠去甲(NA)试剂盒

Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit 人型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2试剂盒人癌易感蛋白2(BRCA-2)试剂盒规格：96T/48T

植物组织线粒体超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分离试剂盒50次

Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit人脱氢酶(SDH)试剂盒规格：96T/48T

酰基脱氢酶长链抗体

SLPI重组人 SLPI 蛋白 Protein

SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽

EPCAM重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein

CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

NRP1 Protein Human 重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签)

兔冠状动脉内皮细胞SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽

CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

SLPI重组人 SLPI 蛋白 Protein

NRP1 Protein Human 重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签)

EPCAM重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。