细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔骨内膜间充质干分离自股骨、胫骨；骨内膜是一层致密结缔组织膜，覆盖在骨的表面（关节面除外），新鲜骨内膜呈粉红色，含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外，附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经，通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层，外层主要是粗大的胶原纤维束，部分纤维穿入骨质，使骨内膜固定于骨面；内层疏松，含成骨细胞和破骨细胞（分别具有产生新骨质和改建骨的功能）。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜，叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力，以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质，所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。 方法简介：
公司实验室分离的兔骨内膜间充质干采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的兔骨内膜间充质干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔骨内膜间充质干细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 股骨、胫骨 | 产品货号 | YS-01X7064 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)试剂盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit Mouse soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒 MouseErythropoietin,EPOELISAKit 小鼠红细胞生成素(EPO)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanImmunoglobulinA,IgAELISAKitA 微型RNA(miRNA)文库构建技术试剂盒5次 ELISAKitMT大鼠金属硫蛋白 小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠透明质酸(HA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 肌微管素相关蛋白11抗体 小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)试剂盒 Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗环胍肽抗体(CCP)试剂盒 96T/48T 进口分装 HeneggImmunoglobulinofYolk,IgY试剂盒鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)试剂盒规格：96T/48T 真菌/酵母细胞细胞壁分离试剂盒20次 mouseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit小鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒规格：96T/48T 细胞表面趋化因子受体6（CD196）抗体 F3重组大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein ER-alpha 雌激素受体alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受体alpha IGFBP6重组人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 标签) CEACAM1 Protein Mouse 重组小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 兔骨内膜间充质干细胞ER-alpha 雌激素受体alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受体alpha CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 标签) F3重组大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein CEACAM1 Protein Mouse 重组小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 IGFBP6重组人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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