细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔肺大静脉内皮分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。细胞呈多边形鹅卵石状排列；该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。 方法简介：
公司实验室分离的兔肺大静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的兔肺大静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔肺大静脉内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肺静脉组织 | 产品货号 | YS-01X7183 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传1-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠细胞周期素D1(CCND1)试剂盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit Mouse three iodothyronine (T3) ELISA Kit 小鼠三甲状腺原(T3)试剂盒 MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 小鼠S100蛋白(S-100)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHSVII-Ab(HumanHerpessimplexvirusIIaibody)ELISAKit人单疱疹病毒Ⅱ型抗体 细胞IKKβ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitLTE4大鼠白三烯E4 小鼠内皮素-1 英文名称： Endothelin-1 英文缩写： ET-1 小鼠嗜酸性粒细胞趋化因子 英文名称： Eotaxin 英文缩写： Eotaxin 小鼠促红细胞生成素 英文名称： erythropoietin 英文缩写： EPO 小鼠红细胞生成素受体 英文名称： erythropoietin receptor 英文缩写： EPOR 脱支酶同源蛋白DBR1抗体 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 试剂盒 96T/48T Human ornithine carbamoyl ansferase (OCT) ELISA Kit 人鸟氨基甲酰转移酶(OCT)试剂盒 Humanmultidrugresistance-associatedprotein,MRPELISAKit 人多药耐药相关蛋白(MRP)试剂盒 96T/48T 进口分装 GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70试剂盒豚鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒规格：96T/48T 真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性滤膜染色试剂盒20次 MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit小鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)试剂盒规格：96T/48T DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗体 MET重组食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 EPOR重组人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein CPNE1 Protein Human 重组人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 标签) TSLP Protein Mouse 重组小鼠 TSLP 蛋白 兔肺大静脉内皮细胞IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 CPNE1 Protein Human 重组人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 标签) MET重组食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein TSLP Protein Mouse 重组小鼠 TSLP 蛋白 EPOR重组人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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