细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人子宫平滑肌分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态，在孕期能大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动，辅助生产。 方法简介：
公司实验室分离的人子宫平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人子宫平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人子宫平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 子宫组织 | 产品货号 | YS-01X7209 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NAADP)试剂盒 ，英文名： NAADP ELISA Kit Mouse thrombin receptor () ELISA Kit 小鼠受体()试剂盒 MouseErythropoietieceptor,EPORELISAKit 小鼠红细胞生成素受体(EPOR)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanCompleme4,C4ELISAKit人补体蛋白4 细胞CASEINKINASE1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitLebtospira大鼠钩端IgG 小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒 96T/48T 小鼠内脏脂肪特异性丝酸蛋白酶抑制剂(vaspin)试剂盒 96T/48T 小鼠内皮脂肪酶(EL)试剂盒 96T/48T 小鼠内皮抑素(ES)试剂盒 96T/48T 髓细胞/淋巴细胞或混合谱系白血病蛋白6抗体 小鼠热休克因子1(HSF1)ELISA 试剂盒 96T/48T Human brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 人脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒 HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 人雌激素诱导蛋白PS2试剂盒 96T/48T 进口分装 guineapigIerferonγ,IFN-γ试剂盒豚鼠γ干扰素(IFN-γ)试剂盒规格：96T/48T 真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量试剂盒20次 MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒规格：96T/48T BRPF3蛋白抗体 IgG2a重组小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 Protein 胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重组蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) AKR1C2重组人 AKR1C2 蛋白 Protein CPLX2 Protein Human 重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 CD59 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 人子宫平滑肌细胞alpha Adaptin/AP1 衔接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 衔接蛋白α抗原 CPLX2 Protein Human 重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 IL6ST重组小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein BST1 Protein Rat 重组大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 标签) C1D重组人 C1D 蛋白 (GST 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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