细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人胰腺癌组织源星状分离自患有胰腺癌病人的胰腺癌组织；胰腺癌是一种恶性程 度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%，是预后差的恶性肿瘤之一。胰腺癌早期的确诊率不高，手术死亡率较高，而很低。胰腺癌 的病因尚不十分清楚。其发生与吸烟、饮酒、高脂肪和高蛋白饮食、过量饮用咖啡、环境污染及遗传因素有关；近年来的调查报告发现糖尿病人群中胰腺癌的发 病率明显高于普通人群；也有人注意到慢性胰腺炎病人与胰腺癌的发病存在一定关系，发现慢性胰腺炎病人发生胰腺癌的比例明显增高；另外还有许多因素与此 病的发生有一定关系，如职业、环境、地理等。随着医学技术的进步，大部分癌症的生存率都在提高，例如乳腺癌，结直肠癌等肿瘤，近几十年来，生存率得到 了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滞不前，缺乏有效的治疗方法，的死亡率使其成为“癌中"，近年来胰腺癌微环境的研究引起了诸多学者的重视。胰腺癌微环境构成复杂，其中，胰腺星状细胞是胰腺癌微环境中重要的间质细胞之一，在胰腺癌细胞生长、迁移、侵袭、血管生成、免疫逃逸、转移及化疗耐药中发挥重要的作用。因此针对胰腺星状细胞和胰腺癌细胞相互作用的研究有望提高胰腺癌患者的预后。胰腺星状细胞(pancreaticstellate cells , PSC)是一种胰腺特异性间质细胞，多在胰腺组织内血管和导管周围聚集，环绕在腺泡的基底部位，正常静比状态下只占胰腺细胞的4%左右，细胞质中含有丰富的素A脂滴，以表达胶质纤丝酸性蛋白质(glial filament acidic protein , GFAP )、结合蛋白(Desmin)为特征。在胰腺组织损伤、应激等条件下PSC被激活，成为一种肌成纤维细胞，胞质中富含A的脂滴消失，以表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin , α-SMA)为标志，能大量合成细胞外基质(extracellular matrix , ECM)和分泌多种细胞因子。胰腺癌微环境中存在大量激活的PSC，在胰腺癌的发生发展中起着重要作用。PSC通过诱导胰腺癌细胞(pancreatic cancercells , PCC)上皮一间质转变(epithelial-mesenchymaltransition , EMT)促进胰腺癌侵袭和转移侵袭和转移是肿瘤细胞脱离原发肿瘤灶到达靶器官的一个多步骤过程，众多研究表明EMT与胰腺癌的侵袭转移密切相关。EMT主要的特征是上皮细胞特征丢失同时伴间质细胞特征获得，如E一钙茹蛋白(E-cadherin)表达下降，波形蛋白(Vimentin)表达上调。karnevi等研究发现，PSC与PCC共培养后能够诱导PCC上皮性细胞标志(E-cadherin , β-catenin)丢失，促进间质性细胞标志(Vimentin,Snai-1）获得，表明PSC在PCC的EMT形成过程中发挥了重要的作用。PSC参与胰腺癌进展的各个环节，而PSC活化是PSC发挥功能的重要部分。因此，如能抑制PSC活化或控制PSC细胞功能将为胰腺癌综合治疗提供潜在的治疗策略。因此，随着针对抑制PSC活化或其功能的研究的深入，有望从胰腺癌微环境角度切实提高胰腺癌的综合治疗效果。

方法简介：

实验室分离的人胰腺癌组织源星状采用胶原酶消化法结合密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的人胰腺癌组织源星状经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：

培养基：含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人胰腺癌组织源星状体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒

Human visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒

HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 人表面活性蛋白D(SP-D)试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapighepatocytegrowthfactor,HGF试剂盒豚鼠肝细胞生长因子(HGF)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量试剂盒20次

MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)试剂盒规格：96T/48T

人总铁结合力（TIBC）试剂盒   96T/48T

人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒   96T/48T

人总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒   96T/48T

人总蛋白（TP）试剂盒   96T/48T

肿瘤/睾丸抗原62抗体

豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)试剂盒

HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP试剂盒人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)试剂盒规格：96T/48T

组织D-葡萄糖激酶法定量试剂盒20次

HumanProstaglandinE2，PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)试剂盒规格：96T/48T

α-辅肌动蛋白4重组兔单克隆抗体

CDH1重组小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型猪流感病毒H1N1-M2蛋白

USP46重组人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 标签) Protein

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)

人胰腺癌组织源星状细胞蛋白激酶Cδ(PKCδ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签)

AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。