细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人外周血巨噬分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以长期生存。巨噬细胞（Macrophages）是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。 方法简介：
实验室分离的人外周血巨噬采用取外周血、通过密度梯度离心法、差速贴壁、细胞因子诱导法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的人外周血巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人外周血巨噬细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X8306 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 巨噬细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：巨噬细胞样 传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群 消化液：（12mM） 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 人外周血巨噬体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 试剂盒 Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人(VD)试剂盒 Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit 人抗抗体(AsAb)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanChlamydiaachomatis,CT试剂盒人沙眼衣原体(CT)试剂盒规格：96T/48T 转基因玉米T25品系试剂盒20次 Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor,SLPIELISAKit人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)试剂盒规格：96T/48T 人组酸丰富糖蛋白(HRG)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit 人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 人膜联蛋白A5(ANXA5)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit 人HA丝酸肽酶1(HA1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit EB病毒核抗原1抗体 豚鼠黄体激素(LH)试剂盒 ，英文名： LH ELISA Kit Human apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 人凋亡诱导因子(AIF)试剂盒 MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit 猴白介素6(IL-6)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforbFGF-6ELISAKit大鼠碱性成纤维细胞生长因子6 细菌乳糖酵解酚红琼脂平板50个 RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit兔子白介素2(IL-2)试剂盒规格：96T/48T 骨形态发生蛋白11单克隆抗体 WIF1重组小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein 催乳素(PRL)重组蛋白 Recombinant Prolactin (PRL) BTK重组人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 NT5E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 人外周血巨噬细胞ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促肾上腺皮质激素(18-39)(抗原) IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 BID重组小鼠 BID 蛋白 (His & GST 标签) Protein IL2RG Protein Rat 重组大鼠 IL2RG / CD132 蛋白 CABP5重组人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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