细胞简介: 
人外周血T淋巴分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。T淋巴细胞(T-lymphocyte)来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居,并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环,发挥细胞免疫及免疫调节等功能。T细胞的再循环有利于广泛接触进入体内的抗原物质,加强免疫应答,较长期保持免疫记忆。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志,主要是表面抗原和表面受体。这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子。多能干细胞转变为淋巴样前体细胞(Lymphoid precursor)迁移至胸腺,在素的诱导下,经历一系列有序的分化过程,逐渐在胸腺发育成熟为识别各种抗原的T细胞库。T淋巴细胞进入胸腺后首先经历两个阶段:①早期T淋巴细胞发育阶段,即始祖CIM和CD8双阴性T淋巴细胞(double negative cell,DN)分化为CD4和CD8双阳性T细胞(double positive cell,DP);②DP细胞分别经历阳性选择阶段和阴性选择阶段获取MHC限制性识别能力和对自身抗原的耐受性,发育为其表面标志为CD4或CD8的单阳性T细胞(single positive cell,SP),迁往周围淋巴器官定居。T细胞是相当复杂的不均一体、又不断在体内更新、在同一时间可以存在不同发育阶段或功能的亚群,但分类原则和命名比较混乱,尚未统一。按免疫应答中的功能不同,可将T细胞分成若干亚群,一致的有:1、辅助性T细胞(Helper T cells,Th),具有协助体液免疫和细胞免疫的功能;2、抑制性T细胞(Suppressor T cells,Ts),具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能;3、效应T细胞(Effector T cells,Te),具有释放淋巴因子的功能;4、细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc),具有杀伤靶细胞的功能;5、迟发反应T细胞(Delayed type hypersensitivity T cells,Td),有参与Ⅳ型反应的作用;放大T细胞(Ta),可作用于Th和Ts,有扩大免疫效果的作用;6、原始的或天然T细胞(Virgin or Natural T cells),他们和抗原接触后分化成效应T细胞和记忆T细胞;7、记忆T细胞(Memory T cell,Tm),有记忆特异性抗原刺激的作用。T细胞在体内存活的时间可数月至数年。其记忆细胞存活的时间则更长。其中,Th细胞又被称为CD4+细胞,因为其在表面表达CD4(cluster of differentiation 4)。通过与MHCⅡ(主要组织相容性复合体,major histocompatibility complex)递呈的多肽抗原反应被激活。MHCⅡ在抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APCs)表面表达。一旦激活,可以分泌细胞因子,调节或者协助免疫反应。Tc细胞又名为CD8+细胞,其表面表达CD8。这类细胞可以通过MHCI与抗原直接结合。淋巴细胞主要包括T淋巴细胞(CD3+),B淋巴细胞(CD19+),NK细胞(CD16+CD56+)。 方法简介: 
实验室分离的人外周血T淋巴采用取外周血、通过密度梯度离心法结合磁珠分选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测: 
实验室分离的人外周血T淋巴经CD3免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人外周血T淋巴细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X8305 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形 |
培养信息:

培养基:基础培养基,含IL-2、Penicillin、Streptomycin等 换液频率:每2-3天换液一次 生长特性:悬浮 细胞形态:圆形 传代特性:不建议传代 培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 人外周血T淋巴体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞传代步骤:
 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 细胞冻存步骤:
 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 公司正在出售的产品:
 小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 试剂盒 Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受体(VD R)试剂盒 Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明带抗体(aZP)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humancholesterol,CH试剂盒人(CH)试剂盒规格:96T/48T 紫外线处理DNA损伤彗星荧光试剂盒20次 HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)试剂盒规格:96T/48T 人组织蛋白酶D(cath-D)试剂盒 96T/48T 人组织蛋白酶B(cath-B)试剂盒 96T/48T 人组蛋白H2b(histon-H2b)试剂盒 96T/48T 人组胺(HIS)试剂盒 96T/48T EYA4蛋白抗体 豚鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)试剂盒 ,英文名: MMP8 ELISA Kit Human calcineurin (CaN) ELISA Kit 人钙调0酸酶(CaN)试剂盒 rabbitEndothelin1,ET-1ELISAKit 兔子内皮素1(ET-1)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforBACE2(Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2)ELISAKit人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2 线虫二环氧丁烷(diepoxybane)诱导突变试剂盒10次 Rabbitcardiacisoformofopni,cELISAKit兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)试剂盒规格:96T/48T 含半胱和组丰富域蛋白1抗体 BID重组小鼠 BID 蛋白 (His & GST 标签) Protein ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促肾上腺皮质激素(18-39)(抗原) CABP5重组人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 IL2RG Protein Rat 重组大鼠 IL2RG / CD132 蛋白 人外周血T淋巴细胞催乳素(PRL)重组蛋白 Recombinant Prolactin (PRL) IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 WIF1重组小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein NT5E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 BTK重组人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
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