细胞简介：

人淋巴结成纤维分离自淋巴组织；淋巴结是呈椭圆形或蚕豆形的淋巴组织小体，大小不一，新鲜时呈灰红色。穿插于淋巴管的行程中，并与淋巴管相通连。淋巴结主要由淋巴组织和淋巴窦组成，外面包以致密结缔组织被膜，被膜向淋巴结内伸入，形成许多间隔或小梁，构成淋巴结的网状支架，并把淋巴结实质分隔成许多部分。这些结缔组织由成纤维细胞构成，对淋巴管起到保护和支持作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

实验室分离的人淋巴结成纤维采用混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的人淋巴结成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人淋巴结成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

兔子白介素1(IL-1)ELISA 试剂盒

Human von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒

HumanBlockingaibody,BAELISAKit 人封闭抗体(BA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humaneyemuscleaibody,EMAb试剂盒人抗眼肌抗体(EMAb)试剂盒规格：96T/48T

组织TIE2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受体(OSMR)试剂盒规格：96T/48T

溶酶体相关膜蛋白3   英文名称：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   英文缩写：   LAMP3

人乳酸脱氢酶   英文名称：   Human Lactate Dehydrogenase   英文缩写：   LDH

人   英文名称：   lysozyme   英文缩写：   LZM/LYS

甘露聚糖结合凝集素丝酸肽酶-2   英文名称：   mannan-binding lectin associated serine proteases   英文缩写：   MASP-2

TATA盒结合蛋白相关因子TAF1C抗体

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒 ，英文名： CGRP ELISA Kit

Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相关因子(FAS/CD95)试剂盒

MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬细胞移动抑制因子(MIF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子9

细菌同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂20次

rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)试剂盒规格：96T/48T

磷酸化内收蛋白gamma抗体

TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein

MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)

TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签)

人淋巴结成纤维细胞MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)

IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein

MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签)

TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein