细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人口腔黏膜成纤维分离自口腔黏膜组织；口腔各壁都有黏膜覆盖，口腔黏膜在组织学上由上皮和固有层组成，并借黏膜下层与深部组织相连。口腔黏膜的前方与唇部皮肤相连，后面与咽部黏膜相延续，是消化道的前端，因此其结构和功能具有皮肤和消化道黏膜的某些特点。人口腔黏膜成纤维主要来自口腔黏膜固有层组织。成纤维细胞是结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 方法简介：
实验室分离的人口腔黏膜成纤维采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的人口腔黏膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人口腔黏膜成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 口腔黏膜 | 产品货号 | YS-01X8299 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 人口腔黏膜成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠成纤维细胞生长因子11(FGF11)试剂盒 ，英文名： FGF11 ELISA Kit Human XC chemokine receptor 1 (XCR1) ELISA Kit 人XC趋化因子受体1(XCR1)试剂盒 RatCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforCr(MouseCrosslaps)ELISAKit小鼠骨胶原交联 细胞血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量试剂盒20次 RatCystatinC,Cys-CELISAKit大鼠半胱蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)试剂盒规格：96T/48T 乳酸（LD）（血清、组织）检测 Lactic acid (LD) (whole blood) detection 乳酸（LD）（全血）检测 Lactate dehydrogenase (LDH) detection 乳酸脱氢酶（LDH）检测 ATP enzyme (sodium and potassium, calcium and ATP enzyme) detection ATP酶（、钙ATP酶）检测 Any one, sodium potassium calcium and ATP enzyme detection MS4A12蛋白抗体 豚鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒 ，英文名： M-CSF ELISA Kit Human apoptosis protease activating factor 1 (ICAD) ELISA Kit 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)试剂盒 Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforBFP(Humanbasicfetoprotein,BFP)ELISAKit人碱性胎儿蛋白 细菌氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次 rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit兔子白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒规格：96T/48T 核仁蛋白10抗体 CD59重组食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein KT3 tag KT3 tag标签抗原 0.5mgKT3 tag KT3 tag标签抗原 CPLX2重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 Protein IL1R1 Protein Human 重组人 IL1R1 / CD121a 蛋白 IgG2a Protein Mouse 重组小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 人口腔黏膜成纤维细胞KT3 tag KT3 tag标签抗原 0.5mgKT3 tag KT3 tag标签抗原 IL1R1 Protein Human 重组人 IL1R1 / CD121a 蛋白 CD59重组食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein IgG2a Protein Mouse 重组小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 CPLX2重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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