细胞简介：

人滑膜成纤维(类风湿关节炎)分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。类风湿关节炎(RA)是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。RA的发病可能与遗传、感染、性激素等有关。RA关节炎的病理主要有滑膜衬里细胞增生、间质大量炎性细胞浸润，以及微血管的新生、血管翳的形成及软骨和骨组织的破坏等。体外培养人滑膜成纤维(类风湿关节炎)对于研究类风湿关节炎疾病的发生机理、治疗具有重要意义。

方法简介：

实验室分离的人滑膜成纤维类风湿关节炎)采用混合酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的人滑膜成纤维类风湿关节炎)经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人滑膜成纤维(类风湿关节炎)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠肝X受体β(LXRβ)试剂盒 ，英文名： LXRβ ELISA Kit

Iestinal efoil factor (ITF) ELISA Kit 猪肠三叶因子(ITF)试剂盒

人博卡病毒(HBoV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMCV(Humanai-matedciullinatedvimeinaibody)ELISAKit人抗突变型瓜波形蛋白抗体

体液人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增试剂盒20次

ELISAKitβOHB牛β

乳糖  100g

D-Lactosemonohydrate   500g

二硫赤鲜醇   5g

DL-DTE

FITC标记人CD71单克隆抗体

豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 ，英文名： OVA sIgE ELISA Kit

Eighth factor related aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 人第八因子相关抗原(FⅧAg)试剂盒

MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 猴坏死因子α(TNF-α)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBGP/Gehrelin(Humanbrain-gpeptides)Elisakit人脑肠肽

细菌葡萄糖酵解酚红琼脂平板50个

RabbitLactoferrin,LTF/LFELISAKit兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)试剂盒规格：96T/48T

A型流感病毒（H9N2）血凝素HA1抗体

LDLR重组人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)重组蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL18RAP Protein Human 重组人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 标签)

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

人滑膜成纤维细胞(类风湿关节炎)血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)重组蛋白 Recombinant Angiopoietin Like Protein 6 (ANGPTL6)

IL18RAP Protein Human 重组人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 标签)

LDLR重组人 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein