细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人滑膜成纤维（骨性关节炎）分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。类风湿关节炎（RA）是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失。RA的发病可能与遗传、感染、性激素等有关。RA关节炎的病理主要有滑膜衬里细胞增生、间质大量炎性细胞浸润，以及微血管的新生、血管翳的形成及软骨和骨组织的破坏等。体外培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞对于研究类风湿关节炎疾病的发生机理、治疗具有重要意义。退行性骨关节病又称骨关节炎（OA）、退行性关节炎、老年性关节炎、肥大性关节炎，是一种退行性病变，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。本病多见于中老年人群，好发于负重关节及活动量较多的关节（如，颈椎、腰椎、膝关节、髋关节等）。过度负重或使用这些关节，均可促进退行性变化的发生。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。

方法简介：

实验室分离的人滑膜成纤维（骨性关节炎）采用混合酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的人滑膜成纤维（骨性关节炎）经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人滑膜成纤维(骨性关节炎）体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠间隙连接蛋白43(CX43)试剂盒 ，英文名： CX43 ELISA Kit

Inu Susuke factor II (HC II) ELISA Kit 犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)试剂盒

RatAi-ypsin,ATELISAKit 大鼠抗(AT)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFFAELISAKit大鼠游离脂肪酸

细胞基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量试剂盒20次(10样本)

RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)试剂盒规格：96T/48T

乳铁蛋白（ Lactoferrin ）   作用：   ELISA  

白血病抑制因子 (LIF)   作用：   ELISA  

脂蛋脂酶 A2(LP-PLA2)   作用：   ELISA  

脂肪细胞刺激因子 (LSP)   作用：   ELISA

ADP核糖基化样因子ARL3抗体

豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat androgen (androgen) ELISA Kit 大鼠雄激素(androgen)试剂盒

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1AbIgG)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1试剂盒人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)试剂盒规格：96T/48T

组织ERK1/2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

Humanprogesteronereceptor，PGRELISAKit人孕同受体(PGR)试剂盒规格：96T/48T

驱动蛋白家族成员12抗体

CLMP重组人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

血管活性肠肽(VIP)重组蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 标签)

人滑膜成纤维细胞（骨性关节炎)血管活性肠肽(VIP)重组蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)

IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白

CLMP重组人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 标签)

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。