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研生elisa 销售网点(上海研生实业有限公司) >> 产品展示 >> 原代细胞 >> 人原代细胞 >> 人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)
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产品型号:
产品名称:
人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)
产品报价:
2800
产品特点:
人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)公司正在出售的产品:G蛋白偶联受体123抗体 eIF2B蛋白抗体 核受体共激活因子7抗体 大鼠肺大动脉内皮细胞 小鼠主动脉外膜成纤维细胞 DI TNC1大鼠脑间质细胞 TtT/GF (小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞)
  人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)的详细资料:

人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

| 商品属性:

组织来源

骨髓

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

产品货号

YS-01X8292

生长特性

贴壁

细胞形态

圆形、梭形、多角形,形态多样

用途

仅供科研研究实验

| 细胞介绍:

人骨髓树突状分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的;树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSFIL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80CD86MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。

| 方法简介:

实验室分离的人骨髓未成熟DC采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

| 质量检测:

实验室分离的人骨髓树突状(未成熟DC细胞)CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:半贴壁半悬浮

细胞形态:圆形、梭形、多角形,形态多样

传代特性:属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液:0.25%

培养条件:气相:空气,95%CO25%

人骨髓树突状(未成熟DC细胞)体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

| 细胞培养操作:

1)复苏细胞:将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

| 注意事项:

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用。

| 公司正在出售的产品

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人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原

IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (Fc 标签)

NT5E重组大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

PRDX6重组人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein


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