细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人直肠平滑肌分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式；肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。 方法简介：
公司实验室分离的人直肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人直肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人直肠平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 直肠组织 | 产品货号 | YS-01X7193 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)试剂盒 ，英文名： MMP23B ELISA Kit Mouse ansferrin receptor (TFR/CD71) ELISA Kit 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)试剂盒 RatPepsinELISAKit 大鼠(Pepsin)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforFA(HumanFolicacid)ELISAKit人 细胞碱性0酸酶活性染色试剂盒50次 Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAKit大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)试剂盒规格：96T/48T 小鼠羟脯酸(Hyp)试剂盒 96T/48T 小鼠强啡肽(Dyn)试剂盒 96T/48T 小鼠前心肽(Pro-ANP)试剂盒 96T/48T 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒 96T/48T B7H6蛋白抗体 小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA 试剂盒 96T/48T Human immunosuppressive acidic protein (IAP) ELISA Kit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)试剂盒 HumanLactoferrin,LTF/LFELISAkit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)试剂盒 96T/48T 进口分装 GH试剂盒鱼类释放激素规格：96T/48T 真菌/酵母钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次 MouseCollagenaseIELISAKit小鼠胶原酶I(CollagenaseI)试剂盒规格：96T/48T 乳腺癌扩增序列蛋白4抗体 FGF2重组人 bFGF / FGF2 蛋白 Protein 尿皮质素1(UCN1)重组蛋白 Recombinant Urocortin 1 (UCN1) ENPEP重组人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 Protein COCH Protein Human 重组人 Cochlin / COCH 蛋白 (short isoform, His 标签) HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 人直肠平滑肌细胞尿皮质素1(UCN1)重组蛋白 Recombinant Urocortin 1 (UCN1) COCH Protein Human 重组人 Cochlin / COCH 蛋白 (short isoform, His 标签) FGF2重组人 bFGF / FGF2 蛋白 Protein HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 ENPEP重组人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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