细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人心脏微血管内皮分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明，心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。 方法简介：
公司实验室分离的人心脏微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人心脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人心脏微血管内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 心脏组织 | 产品货号 | YS-01X7283 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠热休克蛋白40(HSP40)试剂盒 ，英文名： HSP40 ELISA Kit Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)试剂盒 RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫转移酶pi基因 细胞超氧化物阴离子比色法定量试剂盒20次 Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)试剂盒规格：96T/48T 小鼠试剂盒 小鼠试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠试剂盒、小鼠试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 小鼠生长激素释放肽试剂盒 小鼠生长激素释放肽试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠生长激素释放肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠生长激素释放肽试剂盒、小鼠生长激素释放肽试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 小鼠生长激素释放多肽试剂盒 小鼠生长激素释放多肽试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠生长激素释放多肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠生长激素释放多肽试剂盒、小鼠生长激素释放多肽试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 小鼠损伤分子试剂盒 小鼠损伤分子试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠损伤分子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠损伤分子试剂盒、小鼠损伤分子试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 ARC1抗体 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒 HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)试剂盒 96T/48T 进口分装 Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP试剂盒鸭环0酸腺苷(cAMP)试剂盒规格：96T/48T 载玻片细胞组蛋白H3-K4甲基化荧光显微镜试剂盒(针对一甲基)10/20次 MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)试剂盒规格：96T/48T 非活性双特异性磷酸酶抗体27抗体 IL6ST重组小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) Protein CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人) VCL重组人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein CLEC1B Protein Human 重组人 CLEC1B / CLEC2 蛋白 IL9 Protein Rat 重组大鼠 IL9 / IL-9 蛋白 人心脏微血管内皮细胞CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人) CLEC1B Protein Human 重组人 CLEC1B / CLEC2 蛋白 IL6ST重组小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) Protein IL9 Protein Rat 重组大鼠 IL9 / IL-9 蛋白 VCL重组人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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