细胞简介：

人小气道上皮分离自小气道；临床上通常将内径小于2mm的小细支气管称为小气道。小气道具有气流阻力小，但易阻塞的特点。在平静吸气时，空气进入狭窄的鼻咽部，产生涡流。由于小气道已无软骨支持，在脱离纤维鞘嵌入肺组织后，管腔通畅性不象软骨性气道，易于受胸腔的压力变化的影响。小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层，作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处，这些细胞在功能上能够调节免疫反应、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子，并可能通过HLA-DR表达呈递抗原；它们还能产生液体有助于肺液的平衡。许多呼吸道疾病，如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化，都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏；小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择。小气道的生理功能特点：①小气道阻力小；②气流速度慢；③可调节控制通气与血流比例。

方法简介：

公司实验室分离的人小气道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人小气道上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)试剂盒 ，英文名： IGFBP2 ELISA Kit

Mouse visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1ELISAkit 小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanCTX-2ELISAKit人骨退化特异标志物

细胞a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量试剂盒20次

ELISAKitOPN大鼠骨桥素

小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠淋巴细胞因子ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗利尿激素/血管加压素/精酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

氯离子通道蛋白2抗体

小鼠酸激酶(PK)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 大鼠轻化1(HYD)试剂盒

HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-B试剂盒人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒规格：96T/48T

植物组织可溶性总蛋白制备试剂盒20次

HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗体试剂盒规格：96T/48T

粘蛋白19抗体

RBP4重组大鼠 RBP4 蛋白 Protein

HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原

PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CLDN11 Protein Human 重组人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 标签)

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签)

人小气道上皮细胞HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mgHPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原

CLDN11 Protein Human 重组人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 标签)

RBP4重组大鼠 RBP4 蛋白 Protein

IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签)

PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein