细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人外周血DC分离自外周血，由外周血单核细胞诱导而成的；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。DC细胞，全称树突状细胞(DC)，是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC)，能摄取、加工及呈递抗原，启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年在淋巴结中发现，从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞，因其细胞膜向外伸出，形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起，故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。 方法简介：
公司实验室分离的人外周血DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人外周血树突状(DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人外周血树突状细胞(DC细胞) | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X7542 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 树突状 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 半贴半悬浮 细胞形态 树突状 传代特性 属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)试剂盒 ，英文名： PKCζ ELISA Kit N cadherin / neural cadherin (N-Cad) ELISA Kit 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)试剂盒 RatIerleukin17,IL-17ELISAKIT 大鼠白介素17(IL-17)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforCXCR3(HumanCXC-chemokinereceptor3)ELISAKit人CXC趋化因子受体3 细胞色素P450亚酶CYP2E1(NPH)活性比色法定量试剂盒20次 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰合成酶(ACS)试剂盒规格：96T/48T 小鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T AF750标记的多巴胺转运蛋白DAT抗体 小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠A(CsA)试剂盒 Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)试剂盒 96T/48T 进口分装 Chickenα-Glucosidase,a-Glu试剂盒鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)试剂盒规格：96T/48T 载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次 MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)试剂盒规格：96T/48T 白细胞抗原B相关转录蛋白5抗体 NCSTN重组小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein 蛋白激酶Cη(PKCη)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh) VAMP3重组人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 IL10RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 标签) 人外周血树突状细胞(DC细胞)A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽 CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 FGF21重组小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein FGFR4 Protein Rat 重组大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 CANT1重组人 CANT1 蛋白 (Fc 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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