细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人胎盘绒毛膜滋养层分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入子宫内膜后，在胚泡表面形成许多绒毛样的突起，以细胞滋养层为中轴，外裹合体滋养层，称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴，使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织，并与胚体内的血管相通时，次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育，丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘，而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。

方法简介：

公司实验室分离的人胎盘绒毛膜滋养层采用-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人胎盘绒毛膜滋养层经Cytokeratin-7免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA 试剂盒

Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)试剂盒

Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神经丝蛋白(NF)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanactivatedproteinC,APC试剂盒人活化蛋白C(APC)试剂盒规格：96T/48T

脂质过氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量测定试剂盒48/96次

MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒规格：96T/48T

小鼠特异生长因子/相关因子(TSGF)试剂盒   96T/48T

小鼠坏死因子样弱凋亡因子（TWEAK）试剂盒   96T/48T

小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)试剂盒   96T/48T

小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)试剂盒   96T/48T

组织蛋白酶H轻连抗体

小鼠天门冬酸基转移酶(AST)试剂盒 96T/48T

Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人软骨素(CS)试剂盒

HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2试剂盒鸡转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞RyR受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)试剂盒规格：96T/48T

雌酮-3-葡糖苷酸抗体

HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)

SERPINF2重组人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein

CGA Protein Human 重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 标签)

人胎盘绒毛膜滋养层细胞rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)

CGA Protein Human 重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白

HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 标签)

SERPINF2重组人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。