细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人肾小球内皮分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。

方法简介：

公司实验室分离的人肾小球内皮采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人肾小球内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠三腺原酸(T3)试剂盒

People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人内吗非肽-2(EM-2)试剂盒

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉样前体蛋白(βAPP)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs试剂盒豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量试剂盒20次

Mousec-junELISAKit小鼠c-jun试剂盒规格：96T/48T

小鼠纤溶酶原激活剂抑制物-1(mouse PAI-1)   作用：   ELISA 

小鼠血小板生长因子(mouse PDGF)   作用：   ELISA 

小鼠血小板源生长因子-BB(mouse PDGF-BB)   作用：   ELISA 

小鼠血小板生长因子受体α(mouse PDGF sRα)   作用：   ELISA

植烷酰羟化酶2相互作用蛋白抗体

小鼠胃泌素(Gas)试剂盒 96T/48T

Human phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgM) ELISA Kit 人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)试剂盒

HumanElastaseELISAKit 人弹性蛋白酶(Elastase)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin18,IL-18试剂盒鸡白介素18(IL-18)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)试剂盒规格：96T/48T

X染色体开放阅读框20抗体

CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

转铁蛋白受体(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

PRLR Protein Rat 重组大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

人肾小球内皮细胞RNA结合基元蛋白20(RBM20)重组蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

PLK1重组小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein

IL12A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签)

IZUMO1重组人 IZUMO1 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。