细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人乳腺上皮分离自乳腺组织；乳腺是复管泡状皮肤腺，主要由腺上皮细胞组成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，导管末梢发育成腺泡；近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞（MEC）有密切联系，体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织，乳腺由导管和腺泡组成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控，其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮分离自分娩后3-5天的乳腺组织，为贴壁生长型细胞，呈多角形、圆形以及短梭形；乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。 方法简介：
公司实验室分离的人乳腺上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人乳腺上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人乳腺上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 乳腺组织 | 产品货号 | YS-01X7073 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠白细胞介素13(IL-13)试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit Phaseolus vulgaris agglinin (PHA) ELISA Kit 菜豆凝集素(PHA)试剂盒 MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanNeuroglobin,NGBELISAKit人脑红蛋白 铜蛋白电泳染色试剂盒10次 sRANKL大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基 小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠黑色素细胞抗体(MCAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠甲状腺素(T4)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit ELISA. 96T/48T 苯二氮卓单小鼠单抗 小鼠仙台病毒抗体(HVJ-Ab)试剂盒 96T/48T Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)试剂盒 Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神经元性烯醇化酶(NNE)试剂盒 96T/48T 进口分装 ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70试剂盒鸡热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒规格：96T/48T 载玻片细胞CDK3蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次 MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒规格：96T/48T 磷酸化Disabled 1抗体 IL13重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签) Protein 瘦素(LEP)重组蛋白 Recombinant Leptin (LEP) SCGB3A1重组人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 标签) Protein CD97 Protein Human 重组人 CD97 蛋白 HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 人乳腺上皮细胞瘦素(LEP)重组蛋白 Recombinant Leptin (LEP) CD97 Protein Human 重组人 CD97 蛋白 IL13重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签) Protein HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 SCGB3A1重组人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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