细胞简介：

人乳腺癌血管内皮分离自患有乳腺癌的女性乳腺组织；女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99%发生在女性，男性仅占1%。乳腺并不是维持机体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前，乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。

方法简介：

公司实验室分离的人乳腺癌血管内皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人乳腺癌血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠蛋白激酶C(PKC)试剂盒 ，英文名： PKC ELISA Kit

Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 猪血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)试剂盒

病毒H7亚型核酸试剂盒(荧光PCR法) 48T

CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相关0脂酶A2

通用石蜡切片HRP酶联检测封闭溶液10毫升

ELISAKitHSVⅡ-Ab鸡单疱疹病毒Ⅱ型抗体

小鼠血管内皮生长因子受体 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

小鼠血管内皮生长因子受体 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA 

大鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA

APC标记人CD105单克隆抗体

小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)试剂盒

Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羟多巴胺(6-OHDA)试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP试剂盒鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)试剂盒规格：96T/48T

表皮生长因子受体单克隆抗体

BSG重组小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜环肽

STAT6重组人 STAT6 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重组人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 标签)

CDH13 Protein Rat 重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

人乳腺癌血管内皮细胞CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜环肽

CD93 Protein Human 重组人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 标签)

BSG重组小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CDH13 Protein Rat 重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

STAT6重组人 STAT6 蛋白 Protein