细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人气管上皮分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C"字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。 方法简介：
公司实验室分离的人气管上皮采用-混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人气管上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人气管上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 气管 | 产品货号 | YS-01X7035 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
小鼠降钙素(CT)ELISA 试剂盒 Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)试剂盒 HumangranulysinELISAKit 人颗粒溶素(granulysin)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanai-doublesandedDNA,dsDNA试剂盒人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)试剂盒规格：96T/48T 植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量试剂盒20次 HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趋化因子受体1(XCR1)试剂盒规格：96T/48T 小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 作用： ELISA 小鼠载脂蛋白E(mouse APO E) 作用： ELISA 小鼠B淋巴细胞刺激因子(mouse BAFF) 作用： ELISA 小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 作用： ELISA A-Raf抗体 小鼠心肽(ANP)ELISA 试剂盒 96T/48T Gao Min rat thyroxine (u-T4) ELISA Kit 大鼠高敏甲状腺素(u-T4)试剂盒 HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 人透明质酸酶(HAase)试剂盒 96T/48T 进口分装 ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AG试剂盒鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)试剂盒规格：96T/48T 载玻片细胞BAX蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次 MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒规格：96T/48T 辅肌动蛋白相关LIM蛋白抗体 IL12B重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签) Protein NT-3 神经生长因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神经生长因子-3(抗原) ACVR2A重组人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein CD81 Protein Human 重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 标签) ANGPTL4 Protein Mouse 重组小鼠 ANGPTL4 蛋白 人气管上皮细胞NT-3 神经生长因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神经生长因子-3(抗原) CD81 Protein Human 重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 标签) IL12B重组绒猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签) Protein ANGPTL4 Protein Mouse 重组小鼠 ANGPTL4 蛋白 ACVR2A重组人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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