细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人皮肤癌组织源分离自癌组织；癌（cancer）是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中常见的一类。相对应的，起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名，如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症"习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征，其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程，分为致癌、促癌、演进三个过程，与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞，是一种变异的细胞，是产生癌症的病源。癌细胞与正常细胞不同，有无限增殖、可转化和易转移三大特点，能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外（能进行多极分裂），还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。 方法简介：
公司实验室分离的癌组织源采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人皮肤癌组织源经检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人皮肤癌组织源细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 皮肤癌组织 | 产品货号 | YS-01X7465 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠线粒体铁蛋白(FTMT)试剂盒 ，英文名： FTMT ELISA Kit Pla vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 植物2(VD2)试剂盒 MouseImmunoglobulinM,IgMELISAKit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanAmebiasisELISAKit人阿米巴 细胞HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性试剂盒20次 ELISAKitE2大鼠雌二醇 小鼠血小板相关抗体IgG 英文名称： platelet-associated aibody IgG 英文缩写： PAIgG 小鼠增殖细胞核抗原 英文名称： Proliferating Cell Nuclear Aigen 英文缩写： PCNA 小鼠血小板生长因子 英文名称： plateler-derived growth factor 英文缩写： PDGF 小鼠血小板源生长因子-BB 英文名称： plateler-derived growth factor BB 英文缩写： PDGF-BB 丝/苏蛋白激酶NEK9抗体 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat ierferon induced protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)试剂盒 HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)试剂盒 96T/48T 进口分装 Camellipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2试剂盒脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒规格：96T/48T 玉米样品处理试剂盒20次 MouseinhibinB,INH-BELISAKit小鼠抑制素B(INH-B)试剂盒规格：96T/48T APC标记人CD274 (B7-H1, PD-L1)单克隆抗体 IL10RA重组食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 标签) Protein MDR1(multidrug resistance 1 0.5mgMDR1(multidrug resistance 1) 多药耐药蛋白抗原 CHI3L2重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 Protein CD58 Protein Human 重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 NCSTN Protein Mouse 重组小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 人皮肤癌组织源细胞MDR1(multidrug resistance 1 0.5mgMDR1(multidrug resistance 1) 多药耐药蛋白抗原 CD58 Protein Human 重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 IL10RA重组食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 标签) Protein NCSTN Protein Mouse 重组小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 CHI3L2重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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