细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

人脑静脉血管平滑肌分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的人脑静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人脑静脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Porcine apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 猪载脂蛋白A1(apo-A1)试剂盒

ELISA 小鼠凋亡诱导因子(mouse AIF)  进口分装

CLIAKitforLPAb-IgG(HumanLegionellaaibodyIgG)ELISAKit人军团菌抗体IgG

通用型DAB显色溶液A液：10毫升B液：90毫升

ELISAKitIL-17鸡白介素17

小鼠胰岛素试剂盒   小鼠胰岛素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胰岛素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胰岛素试剂盒、小鼠胰岛素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠试剂盒、小鼠试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒   小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒、小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠血小板因子试剂盒   小鼠血小板因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血小板因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血小板因子试剂盒、小鼠血小板因子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

DKK2单克隆抗体

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human leukocyte aigen E (HLA-E) ELISA Kit 人类白细胞抗原E(HLA-E)试剂盒

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 人对(PABA)试剂盒 96T/48T 进口分装

ACTH试剂盒鱼促肾上腺皮质激素规格：96T/48T

油脂DNA萃取试剂盒10次

MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶体20S LMP7抗体

TNFSF11重组小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

表皮生长因子(EGF)重组蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

ARL2BP重组人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

人脑静脉血管平滑肌细胞表皮生长因子(EGF)重组蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

TNFSF11重组小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

ARL2BP重组人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。