细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人呼吸道上皮分离自呼吸道；呼吸道是肺呼吸时气流所经过的通道，有肺脊椎动物的呼吸道分上、下两部：鼻、咽和喉合称上呼吸道。气管及其以后一分再分的管道，合称为下呼吸道，或称为气管树。气管树是随着动物的进化逐渐复杂化的。整个呼吸道内表面都分布有分泌液和纤毛（鼻孔、咽后壁和声带黏膜除外），它能温暖（或冷却）、湿润和净化吸入的空气，对于呼吸器官和机体有着保护作用。呼吸道以骨或软骨做支架，其内表面覆盖着黏膜，黏膜内分布着丰富的毛细血管。呼吸道上皮细胞属于假复层纤毛柱状上皮，分布于呼吸道的内表面，主要由柱状，杯形，梭形和锥形等不同形状细胞组成。看上去像复层上皮，但实际上所有细胞底部均附于基膜上，属单层上皮，故称假复层柱状上皮，上皮表面有纤毛，杯状细胞可分泌粘液，包裹着大量细菌，借助纤毛不断摆动将其慢慢移动至出消化道。 方法简介：
公司实验室分离的人呼吸道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人呼吸道上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人呼吸道上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 呼吸道 | 产品货号 | YS-01X7069 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)试剂盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 猪透明质酸(HA)试剂盒 马铃薯特定基因序列(PATA)核酸试剂盒 48T CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特异性脂蛋白抗体 通用AP酶联检测封闭溶液100毫升 ELISAKitIgY鸡卵黄免疫球蛋白 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 96T/48T 小鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒 96T/48T 小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)试剂盒 96T/48T 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ试剂盒 96T/48T 14-3-3 protein ζ/δ抗体 小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)试剂盒 96T/48T Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)试剂盒 Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加压素(AVP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨 饮料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次 MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒规格：96T/48T SHISA蛋白家族9抗体 KIT重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽 0.5mgAmylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽) IL36G重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein CD22 Protein Human 重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) 人呼吸道上皮细胞Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽 0.5mgAmylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽) CD22 Protein Human 重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 KIT重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) IL36G重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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