细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人骨髓来源巨噬分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。 方法简介：
公司实验室分离的人骨髓来源巨噬采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人骨髓来源巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人骨髓来源巨噬细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 骨髓 | 产品货号 | YS-01X7562 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 巨噬细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 巨噬细胞样 传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群 消化液 （12mM） 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠谷酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)试剂盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 猪β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒 侵袭性大肠杆菌(EIEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干扰素诱导单核细胞因子 体液赖(lysine)含量化学比色法定量试剂盒20次 ELISAKitMHC/BoLA牛主要组织相容性复合体 心肌钙蛋白 (c) 作用： ELISA CXCL8(CXCL-8) 作用： ELISA 结蛋白 (Desmin) 作用： ELISA 雌三醇 (E3) 作用： ELISA 9号染色体开放阅读框78抗体 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T Human soluble adenylate cyclase (sAC) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)试剂盒 HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 人纤维母细胞表面抗原(FSP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3ELISAKit大鼠25羟基3 饮料果胶生物酶比色法定量试剂盒20次 Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit小鼠脂蛋白相关0脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒规格：96T/48T 转化生长因子β4抗体 BDNF重组小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein 弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)重组蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1) VIP重组人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein CD19 Protein Human 重组人 CD19 / Leu-12 蛋白 CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 人骨髓来源巨噬细胞弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)重组蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1) CD19 Protein Human 重组人 CD19 / Leu-12 蛋白 BDNF重组小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 VIP重组人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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