人肺微血管平滑肌细胞

| 商品属性：

| 细胞介绍：

人肺血管平滑肌分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。

| 方法简介：

公司实验室分离的人肺微血管平滑肌采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

| 质量检测：

公司实验室分离的人肺微血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

| 培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

| 细胞培养操作：

1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的产品

大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)试剂盒 ，英文名： sPLA2 ELISA Kit

Porcine maix metalloproteinase 9 (MMP-9) ELISA Kit 猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)试剂盒

转基因植物Sad1基因核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMBLR(HumanMannmabindinglectieceptor)ELISAKit人甘露糖凝集素受体

体液氧化应激活性氧(ROS)比色法定量试剂盒(羟自由基)20次

ELISAKitAFP裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白

血管紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   英文缩写：   AT1R   规格：  

抗血管紧张素‖受体︱型自身抗体   英文名称：    Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   英文缩写：   AT1R-AA   规格：  

血管紧张素Ⅰ   英文名称：   AngiotensinⅠ   英文缩写：   ANGⅠ   规格：  

血管紧张素Ⅱ   英文名称：   Angiotensin Ⅱ   英文缩写：   ANGⅡ   规格：

PerCP-Cy5.5标记人CD81单克隆抗体

小鼠乙型肝核心抗体(HBcAb)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 人可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒

Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit 人细胞角蛋白19(CK-19)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Human6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit人6同前列腺素F1a

饮料D-葡萄糖酸盐比色法定量试剂盒20次

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)试剂盒规格：96T/48T

G蛋白调节诱导神经突增生蛋白2抗体

CD28重组小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素基因相关肽

CMBL重组人 CMBL 蛋白 Protein

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白

MBL1 Protein Mouse 重组小鼠 MBL1 蛋白

人肺微血管平滑肌细胞IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)重组蛋白 Recombinant Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B)

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白

IL12A & IL12B重组小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Rat 重组大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白

PDIA4重组人 ERP72 / PDIA4 蛋白 Protein

| 注意事项：

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用