细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠脉络膜黑色素分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。 方法简介：
实验室分离的大鼠脉络膜黑色素先用消化、后-胶原酶混合消化结合专用培养基筛选法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠脉络膜黑色素经Dopa染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠脉络膜黑色素细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 脉络膜 | 产品货号 | YS-01X8245 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 长梭形 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：长梭形 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠脉络膜黑色素体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠细胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)试剂盒 ，英文名： CSE ELISA Kit Mouse retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 小鼠结合蛋白(RBP)试剂盒 MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforHSP-27(Humanheatshockprotein27)ELISAKit人热休克蛋白27 细胞MEK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitIL-15大鼠白介素15 小鼠抗中性粒抗体试剂盒 小鼠抗中性粒抗体试剂盒 小鼠抗中性粒抗体试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抗中性粒抗体试剂盒、小鼠抗中性粒抗体试剂盒 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体试剂盒 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体试剂盒 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抗增殖细胞核抗原抗体试剂盒、小鼠抗增殖细胞核抗原抗体试剂盒 小鼠抗血小板抗体试剂盒 小鼠抗血小板抗体试剂盒 小鼠抗血小板抗体试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抗血小板抗体试剂盒、小鼠抗血小板抗体试剂盒 小鼠抗心0脂抗体试剂盒 小鼠抗心0脂抗体试剂盒 小鼠抗心0脂抗体试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抗心0脂抗体试剂盒、小鼠抗心0脂抗体试剂盒 G蛋白结合蛋白7抗体 线粒体核糖体蛋白L40抗体 FETUB重组小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原 FGFBP3重组人 FGFBP3 蛋白 Protein CST1 Protein Human 重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 EFNB3 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原 CST1 Protein Human 重组人 Cystatin SN / CST1 蛋白 FETUB重组小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein EFNB3 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 FGFBP3重组人 FGFBP3 蛋白 Protein 大鼠脉络膜黑色素细胞小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA pcr检测试剂盒 Human caneous lymphocyte associated aigen (CLA) ELISA Kit 人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)试剂盒 Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 人胃泌素释放多肽(GRP)pcr检测试剂盒分装 Human6-hydroxydopamine,6-OHDA试剂盒人6-羟多巴胺(6-OHDA)试剂盒规格：96T/48T 正苯基萘胺摄入法细菌膜损伤荧光试剂盒20次 MouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗体(ANA)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
|
