细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠颅盖造骨分离自颅骨组织；造骨细胞（osteoblast）亦称成骨细胞。是参与骨组织形成的细胞。颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块。面颅为颅的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。 方法简介：
实验室分离的大鼠颅盖造骨采用胶原酶消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠颅盖造骨经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠颅盖造骨细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 颅骨 | 产品货号 | YS-01X8241 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
包被条件： 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：梭形、多角形 传代特性：可传3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠颅盖造骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)试剂盒 ，英文名： IGFBP4 ELISA Kit Mouse endothelial lipase (EL) ELISA Kit 小鼠内皮脂肪酶(EL)试剂盒 MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanCyclin-D1ELISAKit人细胞周期素D1 细胞AURORA-C激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitBMPs大鼠骨形成蛋白 脱脂奶粉 100g Skimmilk 500g 超氧化物歧化酶 30KU SOD 3KU 磷酯酶Cγ1抗体 小鼠(CH)Elisa 试剂盒 96T/48T Human placea growth factor (PLGF) ELISA Kit 人胎盘生长因子(PLGF)试剂盒 Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-R试剂盒人B细胞活化因子受体(BAFF-R)试剂盒规格：96T/48T 植物源性饲料油菜(canola)试剂盒20次 Humahrombieceptor,ELISAKit人受体()试剂盒规格：96T/48T 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体 ACP5重组人 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein 序列相似家族5成员C(FAM5C)重组蛋白 Recombinant Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C) HA重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His & Fc 标签) Protein FGFR2 Protein Human 重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein (ECD, aa 1-1297, His 标签) 大鼠颅盖造骨细胞序列相似家族5成员C(FAM5C)重组蛋白 Recombinant Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C) FGFR2 Protein Human 重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 ACP5重组人 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein (ECD, aa 1-1297, His 标签) HA重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His & Fc 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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