细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠结肠成纤维分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠成纤维细胞主要分布于外膜（纤维膜或浆膜）结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 方法简介：
实验室分离的大鼠结肠成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠结肠成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠结肠成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 结肠 | 产品货号 | YS-01X8237 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
包被条件： 培养基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠结肠成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠促生长激素释放激素(GRH)试剂盒 ，英文名： GRH ELISA Kit Mouse 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)试剂盒 ELISA 小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 进口分装 CLIAKitforLILRB4(Humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4)ELISAKit人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4 通用型ECL化学发光显影试剂盒10次 ELISAKit17-KS鸡17-同类固醇 碳酸氢 500g SodiumBite 1kg 四硼酸 5kg SodiumBorate,Decahydrate 500g FAAP24蛋白抗体 小鼠(E)ELISA 试剂盒 96T/48T Human immunoglobulin light chain lambda (lambda -IgLC) ELISA Kit 轻链lambda(λ-IgLC)试剂盒 Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 人的牛血清白蛋白残留检测试剂盒 96T/48T 进口分装 FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGP试剂盒鱼骨钙素/骨谷蛋白(OT/BGP)试剂盒规格：96T/48T 真菌/酵母蛋白巯基/结合巯基含量荧光定量试剂盒20次 MouseCompleme4,C4ELISAKit小鼠补体蛋白4(C4)试剂盒规格：96T/48T 多配体聚糖结合蛋白1抗体 OMG重组小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 标签) Protein AATK peptide 细胞凋亡关联酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 细胞凋亡关联酪激酶抗原 CXCL10重组人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein IFNL1 Protein Human 重组人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 COLEC12 Protein Rat 重组大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 大鼠结肠成纤维细胞蛋白二硫键异构酶(PDI)重组蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI) IFNL1 Protein Human 重组人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 APOA1重组小鼠 ApoA1 蛋白 Protein SELL Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 RPRD1B重组人 RPRD1B 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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