细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠骨髓造血干分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。造血干细胞具有自我更新能力并能分化为各种血细胞的前提细胞，终生成各种血细胞成分，包括红细胞，白细胞和血小板。造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下，造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的生理平衡的角色。临床治疗中，造血干细胞移植广泛应用于血液系统疾病以及自身免疫疾病，在其它实体瘤的治疗中，比如淋巴瘤，生殖细胞瘤，乳腺癌，小细胞肺癌，主要应用于常规治疗失败或复发难治以及具有不良预后因素的患者。造血干细胞以不对称有丝分裂方式进行增殖，一个干细胞分裂产生两个子细胞，一个分化为造血祖细胞，另一个则保持干细胞特征。造血干细胞在不断体外培养产生大量造血祖细胞同时，保持自己既不增殖也不分化。体外培养微环境合适，造血干细胞可持续维持培养 60 天左右。 造血干细胞体外增殖培养需要基质细胞滋养（滋养层细胞），缺少滋养层细胞不增殖，无法长期培养，本产品为收集培养好的造血干悬浮细胞灌装发货，不包含滋养层，因此收货后建议尽快实验。

方法简介：

实验室分离的大鼠骨髓造血干采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的大鼠骨髓造血经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：悬浮

细胞形态：圆形

传代特性：不建议传代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠骨髓造血干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

猪圆环病毒2型抗体ELISA试剂盒

People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)试剂盒

RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C

血清脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量试剂盒20次

Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit猪白介素3(IL-3)试剂盒规格：96T/48T

小鼠仙台病毒（Sendai）试剂盒   96T/48T

小鼠细小病毒（CPV）试剂盒   96T/48T

小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)试剂盒   96T/48T

小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)试剂盒   96T/48T

信号转导和转录激活因子4抗体

小鼠(Pepsin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human phospholipase C gamma chain (PLC 1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ链(PLCγ1)试剂盒

HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交换体3(NHE3)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin2,IL-2试剂盒鸡白介素2(IL-2)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞HISTONEH3蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit小鼠谷脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)试剂盒规格：96T/48T

NOMO蛋白抗体

F11R重组大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 标签) Protein

GFP 绿色荧光蛋白 0.5mgGFP 绿色荧光蛋白

IL1B重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein

CDK2AP2 Protein Human 重组人 CDK2AP2 蛋白

CDNF Protein Mouse 重组小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

大鼠骨髓造血干细胞GFP 绿色荧光蛋白 0.5mgGFP 绿色荧光蛋白

CDK2AP2 Protein Human 重组人 CDK2AP2 蛋白

F11R重组大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 标签) Protein

CDNF Protein Mouse 重组小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

IL1B重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。