细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠肺微血管平滑肌分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。 方法简介：
实验室分离的大鼠肺微血管平滑肌采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠肺微血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠肺微血管平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肺 | 产品货号 | YS-01X8225 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传2-3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠肺微血管平滑肌体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠糖原0酸化酶M(PYGM)试剂盒 ，英文名： PYGM ELISA Kit Mouse placea growth factor (PLGF) ELISA Kit 小鼠胎盘生长因子(PLGF)试剂盒 Rat17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 大鼠17羟孕酮(17-OHP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforH-4(umanNeuroophin4)ELISAKIT人神经营养因子4 细胞PKCδ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKi-proBNP大鼠N端前脑素 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T 嗅觉受体家族5亚基3抗体 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 试剂盒 试剂盒 组装/原装 Rat desmin (Des) ELISA Kit 大鼠结蛋白(Des)试剂盒 Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 人心肌特异性肌钙蛋白T(c)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanadenosinedeaminase,ADA试剂盒人腺苷脱氨酶(ADA)试剂盒规格：96T/48T 直肠标记K-ras粪便检测突变荧光分析试剂盒50次 Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒规格：96T/48T N-α-乙酰转移酶40抗体 FCGR2B重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉诺坦II IL9重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein CYGB Protein Human 重组人 Cytoglobin / CYGB 蛋白 AKT3 Protein Mouse 重组小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 标签) 大鼠肺微血管平滑肌细胞MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉诺坦II CYGB Protein Human 重组人 Cytoglobin / CYGB 蛋白 FCGR2B重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein AKT3 Protein Mouse 重组小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 标签) IL9重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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